【常见问题FAQ】
Q：MitoSox Red 线粒体超氧化物红色荧光探针激发波长是否可以选择396 nm？
A：可以的。虽然该产品在510 nm激发时会显示较强荧光信号，但据发现在396 nm超氧化物产物能被选择性激发且由其它非特异性氧化产物造成的干扰较小，所以激发波长选择396nm是可以的。
Q：染色工作液体积应该加入多少？染色时间可以延长吗？
A：对于35mm共聚焦小皿，推荐1-2ml染色液；对于96孔板推荐100ul染色液。
推荐37℃孵育10min，但可适当延长孵育时间到10-20min，建议不超过30min。
Q：染色时出现入核情况该怎么处理？工作浓度是否可以调整？
A：染色时如遇明显入核情况，可以通过降低工作浓度以及缩短染色时间来进行调整。
对于工作浓度，如出现染色入核及过曝可降低为100 nM到1 μM；如遇染色信号较弱也可调整高于5 μM，同时需对染色工作液进行预热。
Q：是否可以对固定的细胞及组织样本进行染色？
A：不推荐对固定的细胞或组织样本进行染色，会出现染色不成功或是荧光在极短的时间内就淬灭的情况。
【技术参数】
英文名称：MitoSOX Red Mitochondrial Superoxide Indicator
中文名称：红色线粒体超氧化物荧光探针
分子式：C43H43N3IP
分子量： 759.71
Ex/Em：396/610 nm
激发波长：396nm
发射波长：610nm
溶解性： 溶于DMSO
纯度：≥95%
储存条件：-20℃避光干燥
【描述与细胞染色步骤】
MitoSOX Red Mitochondrial Superoxide Indicator（线粒体超氧化物红色荧光探针）是一种特异性检测活细胞线粒体内超氧化物的荧光探针。
其核心机制是通过靶向线粒体并被超氧化物选择性氧化后产生红色荧光。
细胞染色步骤
（一）贴壁细胞染色
细胞准备：将细胞接种于盖玻片或培养皿中，培养至80%密度，弃去培养基。
染色孵育：加入 100μL工作液（覆盖细胞），在 37℃避光孵育5-30分钟。
清洗：用预热的缓冲液（如HBSS或PBS）轻洗细胞3次，每次5分钟，去除未结合的探针。
观察：直接用荧光显微镜或流式细胞仪检测，或进行复染后封片。
（二）悬浮细胞染色
细胞收集：离心收集细胞（400g，5分钟），用PBS洗涤2次。
染色孵育：重悬细胞于 1mL工作液 中，室温避光孵育5-30分钟。
清洗与重悬：离心去除染液，用PBS洗涤后重悬于无血清培养基，进行流式细胞术或荧光成像。
【相关的试剂】
Daminozide
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注意：本试剂用于科研领域，其他用途概不适用！
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